جداسازی و شناسایی مولکولی ویروس های برونشیت عفونی طیور در مرغداریهای صنعتی ایران

هدف : شناسایی مولکولی ویروسهای برونشیت عفونی طیور به روش rt-pcr/rflps از مرغداریهای صنعتی ایران. طرح : مطارعه طولی بین سالهای 1382-1377 نمونه ها: نمونه های بافتی نای، کلیه و ریه گله های مشکوک به بیماری تنفسی. روش : نمونه های بافتی ارجاع شده به آزمایشگاه ویروس شناسی طیور بخش بیماریهای طیور دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران طی سالهای 1382-1377 از گله های گوشتی و تخمگذار به تخم مرغ های جنین دار 9-8 روزه تلقیح شد. 12 جدایه از ویروس هایی که در پاساژ سوم باعث تاخیر در رشد جنین، رسوب اورات در مزونفرون ها یا مرگ جنین شده و از نظر هماگلوتیناسیون گلبول قرمز مرغ منفی بودند و همچنین 5 سویه رفرانس 793/b , d274, m41, d1466, h120 برای آزمایشات مولکولی rt-pcr/rflps انتخاب شدند. rna ویروس استخراج و به کمک آنزیم رونوشت برداری معکوس به cdna تبدیل و متعاقب آن به کمک تکنیک pcr با استفاده از ژل آگار 1 درصد الکتروفورز شده و نمونه های مثبت در pcr که باند اختصاصی بیش از 1600 جفت باز را نشان می دادند توسط آنزیم های محدودگر hae iii , ecori , hind iii هضم شده و الگوهای هضم آنزیمی (rflps) نمونه های مثبت با الگوی rflps سویه های رفرانس 793/b , d274, m41, d1466, h120 با استفاده از ژل آگار 1 درصد الکتروفورز و مقایسه شدند. نتایج : از 12 نمونه مثبت در rt-pcr در هضم آنزیمی با haciii، 8 نمونه الگوی 793/b و بقیه الگوی تیپ mass را در rflps نشان دادند. نتیجه گیری : با توجه به اینکه 793/b نسبت به سویه واکسینال h120 ماساچوست نوعی سروتیپ با همولوژی پایین بوده و می تواند تا حدودی مسئول واگیری برونشیت در گله های واکسینه و توجیه کننده شکست در واکسیناسیون این بیماری باشد، جداسازی و شناسایی این سروتیپ ممکن است مقدمه ای برای تغییر سیاست کنترل و پیشگیری علیه بیماری برونشیت عفونی باشد.